Introducción: los hemocultivos juegan un papel importante en el diagnóstico de bacteriemias. Los medios empleados para este fin presentan una amplia demanda por el MINSAP para cubrir las necesidades en el país y con ello sustituir importaciones. HemoCen, es un medio de enriquecimiento general, diseñado para el cultivo de microorganismos aerobios en sangre. Objetivo: desarrollar la formulación del medio HemoCen Aerobio y evaluar su desempeño analítico. Materiales y Métodos: se evaluó la capacidad de tres medios de cultivo: Caldo Cerebro Corazón, Caldo Triptona Soya y Caldo Tioglicolato, de promover el crecimiento de cuatro de los microorganismos aislados con mayor frecuencia en hemocultivos en Cuba: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Candida albicans. El medio con mejores resultados se enriqueció. La formulación resultante, HemoCen Aerobio, se evaluó desde el punto de vista físicoquímico y organoléptico, culminado con una evaluación del desempeño analítico in vitro. Resultados: el Caldo Triptona Soya se seleccionó como medio basal. Se enriqueció con bases nutritivas, azúcares, factores de crecimiento, suplementos vitamínicos y se le adicionó polianetol sulfonato de sodio, como anticoagulante. HemoCen Aerobio demostró la recuperación microbiana entre 2 y 4 UFC/mL. Se logró un desempeño in vitro favorable, recuperando valores ≤ 18 UFC/mL de sangre. La productividad de HemoCen resultó ≥ 0,7 frente al medio basal y medio de referencia, Liofilchem (Italia). La especificidad analítica del HemoCen Aerobio ante muestras simuladas y naturales resultó del 100%. Conclusiones: se desarrolló la formulación del medio HemoCen Aerobio, con adecuada sensibilidad, especificidad y recuperación microbiana.